基因的分子手术是相当复杂的过程，其中最重要

　　互补碱基之间的配对，形成双链。并在DNA连接酶的作用下，使同一DNA分子的两端连接成环状，或使两个分子连成一大的线状分子。不同限制性内切酶切割DNA产生的三种不同类型的末端(表3-3)。

　　基因的分子手术是相当复杂的过程，除了需要限制性内切酶外，还需要其他- -些工具酶包括连接酶、DNA 聚合酶、RNA聚合酶、核酸酶、末端修饰酶等，对DNA或RNA进行各种各样的修饰。其中最重要的是连接酶。

　　第三节基因工程载体

　　载体(vector, vehicle)的本意就是媒介体,基因工程.上的载体是能将分离或合成的基因导入细胞的DNA分子，称为克隆载体。基因工程中有三种主要类型的载体:质粒DNA、病毒DNA、科斯质粒，其中质粒DNA是最常用的载体，

　　但运载能力低,柯斯质粒是质粒和λ噬菌体DNA的结合体，运载能力最高图3-7)。在这三种类型的基础上，根据不同的目的，出现了各种类型的改造载体。

　　一、质粒载体

　　质粒(plasmid)是染色体以外的遗传物质,它是双链闭合环状DNA分子，其大小可从1kb 到200kb左右,能够在宿主内利用宿主的酶系统进行复制。质粒是基因工程的主要载体。

　　(一)质粒概念

　　1946- 1947年间，Lederberg 和Tatum发现了细菌的接合现象，这是细菌的有性繁殖方式。此后不久， 便弄清了这种接合是两种不同的交配型(接合型),遗传信息总是从供体(雄性)转移到受体(雌性)。

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